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1003 人阅读发布时间:2019-07-11 11:13
作为膜蛋白及组分分离工具,我一直都很低调,只想安静的做个“美男子”或者“小公主”,但是实力不允许啊!明明可以靠颜值吃饭,今天我非要靠才华。
为什么我要嘚瑟一下?因为如今我有了百篇文献,且篇篇出色,全球发表IF平均值高达5.6,荣登Cell,Cell Stem Cell,Cell Research,naturecommunications等知名杂志,并参与数项专利研发。研究内容涉及蛋白转运,信号通路,信号转导,细胞器互作,免疫等多方向。在疾病研究领域涉及阿尔兹海默病,血脑屏障,动脉粥样硬化,慢性肾脏疾病,白血病,先兆子痫等,涉及不同样品百余种,下游实验涉及WB,IP,酶活性,质谱,MSD分析!什么样的一个膜蛋白及组分分离工具才可以完美演绎如此之多的工作,下面我们就一起嘚瑟嘚瑟解读起来吧!
2014年Kutluay等人第一次把Invent MinuteTM Plasma Membrane Protein Isolation And Cell Fraction Kit (cat. #SM-005)送上了Cell,让更多人知道了我的价值,这篇研究HIV-1病毒颗粒组装过程中Gag-RNA复合体的分布及变化情况的文章,实验中关键步骤之一是证明在不同亚细胞结构中Gag-RNA复合体表现出不同形式。用HIV-1病毒质粒转染4SU-fed 293T细胞后,通过离心管柱法进行亚细胞结构分离,分离后的细胞浆和细胞膜组分进行Western印迹和免疫沉淀实验。结果表明,胞浆中的Gag蛋白主要是单体形式,而细胞质膜上的Gag蛋白是多聚体形式(图B)。这一结论很大程度上取决于细胞浆和细胞质膜组分的彻底分离(图A)。
Kutluay, S., et al. (2014). Global Changes in the RNA Binding Specificity of HIV-1 Gag Regulate Virion Genesis, Cell (2014), http://dx.doi.org/10.1016/j.cell.2014.09.057.
Xu et al., (2018) Phosphorylation-Mediated IFN-γR2 MembraneTranslocation Is Required to Activate Macrophage Innate Response. Cell 175, 1–16.
Liu, J., Liu, W., Yang, L., Wu, Q., Zhang, H., Fang, A., ... & Tang, F. (2017). The Primate-Specific Gene TMEM14B Marks Outer Radial Glia Cells and Promotes Cortical Expansion and Folding. Cell Stem Cell.
Luo, Y., Duan, H., Qian, Y., Feng, L., Wu, Z., Wang, F., ... & Yan, X. (2017). Macrophagic CD146 promotes foam cell formation and retention during atherosclerosis. Cell Research, 27(3), 352-372.
2016年中国科学院动物研究所孙钦秒研究组通过酵母双杂筛选得到一个与RIG-I相互作用的蛋白SDC4。通过过表达和基因缺失实验表明:该蛋白在RLRs抗病毒天然免疫中起着负调控作用,缺失该蛋白可以有效控制VSV病毒的复制。其负调控功能在基因缺失的小鼠体内得到了很好的验证。进一步生化和细胞定位的研究表明:SDC4蛋白通过影响去泛素化酶CYLD和RIG-I相互作用以及病毒感染后的核周定位模式来调控RIG-I K63位的泛素进而参与RIG-I介导的抗病毒天然免疫反应。 这项工作首次发现了SDC4通过CYLD影响RIG-I K63位的泛素从而调节抗病毒天然免疫,平衡免疫反应,防止过度免疫对宿主细胞造成损伤。
Syndecan-4 negatively regulates antiviral signaling by mediating RIG-I deubiquitination via CYLD. Nature communications, DOI:10.1038/ncomms11848. http://www.nature.com/naturecommunications.
嘚瑟完了冰山一角,我们来说说为什么Invent MinuteTM Plasma Membrane Protein Isolation And Cell Fraction Kit (cat. #SM-005)可以呈现出完美的结果?我可以自豪的说如下几点:
1.原理上与其他方法不同,有创新有突破,使用离心管柱技术,整体思路设计严谨,巧妙,保证试剂盒工作效率。
2.一个试剂盒可将细胞同时分离为细胞核,细胞浆,细胞器,细胞质膜组分,整个流程中不使用任何表面活性剂及EDTA,不损伤膜结构,跨膜蛋白也无需担心。细胞核,细胞浆,细胞器,细胞质膜组分均可用于各类下游实验。
3.经过百余种细胞及组织样品验证,通用性极强,且操作简单,对操作技术无要求。
4.下游可选购配套溶解液,保证蛋白溶解程度且兼容下游实验,无需查找,尝试自配即可让你的WB,IP,质谱实验顺利进行。
5.样品起始量低,容易获取,减少细胞培养,动物繁育等复杂高成本工作量。操作仅需1小时。
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