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【实验技巧】丽春红染色---那些年你该学会的实验系列(七)

5560 人阅读发布时间:2025-03-03 15:47

【实验技巧】丽春红染色---那些年你该学会的实验系列(七)

英文特生物技术北京有限公司 2018-08-31

新闻图片1
 

 

 

丽春红(Ponceau S)染色是WB实验中的一个重要环节,今天就来给大家详解丽春红染色的作用和操作方法。

 

 
 
 
 
 
丽春红染色作用
 

 

可用于PVDF膜,硝酸纤维素膜和和醋酸纤维素膜上的蛋白的检测。

 

 
 
 
 
 
丽春红染色原理
 

 

丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。

 

 

 
 
 
 
 
丽春红特性
 

丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去。

 

为什么要用丽春红染色?
 

通过丽春红染色可验证转膜效率,及每孔上样蛋白总量是否均等,可以帮助后续实验进行内参调整或问题分析。

 

特别说明:丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白检测。

 

 

 
 
 
 
 
操作方法
 
  1. 将转印膜浸没在丽春红染色液中,用摇床孵育转印膜 1-30 分钟。

  2. 取出转印膜,用去离子水冲洗膜直到背景干净(通常不超过 5 分钟),条带清晰,记录结果。染液可以继续用去离子水洗涤完全去除丽春红,进行后续的WB检测。

 

往期精彩回顾

 

【实验技巧】细胞计数---那些年你该学会的实验系列(一)

 

【实验技巧】BCA法蛋白---那些年你该学会的实验系列(二)

 

【实验技巧】WB内参选择指南---那些年你该学会的实验系列(三)

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