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16630 人阅读发布时间:2025-03-03 15:48
英文特生物技术北京有限公司 2018-10-24
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Q
蛋白提取时要不要加蛋白酶抑制剂呢?
A
当细胞破碎的时候,蛋白水解酶就会被释放出来或被激活,如实验进程较长或样品需长期保存就会影响最终结果分析。为了避免这些情况的出现,建议在样品制备时添加蛋白酶抑制剂,可以有效地防止靶蛋白被内源性蛋白酶降解。
Q
蛋白酶抑制剂有哪些种类?
A
天冬氨酸蛋白酶抑制剂:PMSF,碘@乙酸、抑肽素(Pepstatin),云芝发酵物
Q
蛋白酶抑制剂如何添加?
A
蛋白提取过程中,蛋白酶抑制剂需要在细胞裂解前加入,故通常需要添加到细胞裂解液中,添加的比例可按照蛋白酶抑制剂的倍数添加至1X,例如100X蛋白酶抑制剂,即1ml裂解液中添加10ul蛋白酶抑制剂即可。
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