RIPA不是万能的！

RIPA裂解液提取蛋白是万能的吗？所有实验都可以使用RIPA裂解液提取的蛋白样品做吗？
然而种种案例表明，RIPA并非万能的！
有很多实验使用RIPA裂解液提取的蛋白样品会使得下游实验受到影响，我们集中了以下案例供大家参考！

RIPA 提蛋白真的靠谱吗？文献指出存在这些误区......

多篇 SCI 发现用 RIPA 提蛋白存在问题，我们该如何应对？

细胞凋亡WB没成功，你是不是用了RIPA？

WB半定量内参有丢失，你却一直不知道？

磷酸化蛋白 WB 做不好？原因竟有可能是因为......

大分子量蛋白WB师兄有一点小经验要传授给你！

WB内参条带调不齐是怎么回事？

RIPA裂解液提取蛋白为何会存在问题呢？

通常样品制备我们是这样做的，自配裂解液或购买RIPA，加样品研磨，孵育，离心30分钟，取上清(RIPA可溶组分)进行下游实验，扔掉沉淀（RIPA不可溶性组分）。扔掉的这部分不可溶组分中经证明仍然具有很多蛋白。

如上案例所述，使用 RIPA 裂解液提取总蛋白由于蛋白的丢失会产生很多问题。

⊙丢失的蛋白会引起蛋白图谱的变化

⊙改变不同种类蛋白的比例

⊙改变某些蛋白的活性

理想的总蛋白提取应该是什么样的呢？

1. 获取给定样品中完整的蛋白质图谱，要真实的反映所有蛋白质种类和比例。大多数研究人员认为他们采用的总蛋白提取方法已经反映了体内目前的情况，但是很少有人真正的通过平行实验对比不同的提取方法。在许多情况下，很可能真实的蛋白质图谱和研究者相信的结果不完全相同。

2. 获取最大的蛋白质溶解度，最少的蛋白质损失以及得到完整的蛋白质图谱才是蛋白质提取最佳的选择。

看了上面的种种问题，那么如今我们是否已有办法解决 RIPA 裂解液提取蛋白过程中存在的问题呢？答案是肯定的。

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